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关 键 词：青岛磁珠法提取
行 业：化工 化学试剂
发布时间：2023-01-14
血浆病原DNA提取试剂盒在操作简便性上具有一定优势，更适合于较多样本的检测。对纯度要求较高的实验，可根据实验需求进行选择。
血浆病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取出洗涤液，按以下操作：
洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。
洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。
配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
2、取1.5mL离心管，加入200μL血液样本，再加入200μL 裂解液及40μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴10 分钟。
3、加入150μL异丙醇（总体积的25%），混合均匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。
4、将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液；
5、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
6、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
7、按每份样本40μL 取洗脱液，放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
8、将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 灭菌离心管内，在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中，Trizol方法与离心柱相比，提取效果相当，但是因其对操作者带来的毒性，现在越来越被弃用。磁珠法比较适合机器自动化提取，如果没有核酸提取仪，只是使用磁力架配套提取，磁珠法的操作就比较麻烦且容易导致样本交叉污染。另外，根据研究，磁珠法的核酸提取得率不如离心柱法。如果要提取的游离核酸的量比较低，选择离心柱法。对于游离DNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室，核酸提取方法应是离心柱法。
血浆病原DNA提取试剂盒产品特点：
1、操作简便快速，20分钟左右可获得理想的DNA；
2、提取DNA纯度高，无抑制剂，1.7<A260/A280≤2.0；
3、产量更高，较国内同类产品高出20%；
4、样本范围广，可用于新鲜、冷冻或陈旧的全血样本。
血浆病原DNA提取试剂盒中时间成本、生产率的考虑：
当一次处理超过50个样本时，不再考虑使用小量柱纯化，高通量DNA提取试剂盒是更好的选择，它可以以96孔的形式运行，以便在需要同时处理多个样本的DNA的实验。
DNA提取试剂盒有各种规格和大小，然而，共同的主线是，所选择的试剂盒能产生干净和浓缩的DNA。可以定期评估DNA提取物的数量和质量，以确保试剂盒适合此应用类型。
不同的DNA来源有不同的试剂盒，从实验室培养的细胞，到土壤样本，甚至指纹，也有许多用于某些应用的试剂盒。例如，土壤中的腐殖酸或血液中的血红蛋白会污染纯化的DNA，从而干扰下游的DNA实验（如PCR）。当然，也有一些试剂盒会在进行纯化步骤之前去除这些组分。如果想从PCR或琼脂糖凝胶中纯化DNA，有许多方法可以提高琼脂糖凝胶纯化的回收率。
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