有效去除杂质 只需微量的样本 青岛体液DNA提取试剂盒
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关 键 词:青岛体液DNA提取试剂盒
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2023-01-13
体液病原DNA提取试剂盒(磁珠法)适用于多种生物体液样本(如肺泡灌洗液、痰液、脑脊液等)及拭子样本的微生物DNA提取,可兼容上游经过去宿主核酸流程的样本。
一般来说,核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等,提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀,离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中,一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法,经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤,操作较为繁琐,现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质,会损害人体健康。另外,受到洗脱液体积的影响,往往难以将回收到的dna全部用于检测,进而影响了检测灵敏度。
体液病原DNA提取试剂盒结合在硅基质膜或磁珠表面的DNA,经含醇的盐溶液漂洗可进一步去除细胞残片、非特异吸附的蛋白质和过浓的盐离子,再经纯水等洗脱液即可将纯度较高的DNA洗脱下来,进而应用于下游实验中(如pcr、酶切、连接、测序等);通过酚仿释放至溶液中的核酸,可通过调节酸碱度后加入高浓度醇溶液沉淀出来,再经醇溶液洗涤晾干后即可获得高纯度DNA。
体液病原DNA提取试剂盒采用结合病毒DNA的离心吸附柱和特有的缓冲液系统,体液病原DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的DNA。
该产品可以满足绝大多数的DNA提取要求,如DNA:HBV和CMV等。裂解后,DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,低盐的洗脱缓冲液将纯净的DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。
体液中病原dna的提取步骤中,去污剂用于破坏细胞或病毒蛋白外壳或膜结构,使核酸游离到溶液中,胍盐或盐用于变性蛋白质,释放其结合的核酸并促进核酸与硅基质膜或磁珠结合,同时也具有裂解病毒外壳或膜结构的功能,如果使用溶剂,也可以破坏细胞结构,变性蛋白质进而释放核酸。
体液病原DNA提取试剂盒保存条件:常温运输和保存,长期放置时(1月以上)应该放4℃。且具有挥发性,使用后需要将瓶盖拧紧。
体液病原DNA提取试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的DNA。无需使用氯仿等抽提,特有的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解病毒,使病毒蛋白与DNA分离,在蛋白酶K的作用下降解病毒蛋白,在高盐状态下将DNA选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心步骤,去除蛋白等杂质,然后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的DNA从吸附柱膜上洗脱下来。
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