杭州磁珠法分选 有利于提高对高分子量核酸的提取效率
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关 键 词:杭州磁珠法分选
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2022-12-04
DNA分选纯化试剂盒能从不同类型的水样中发现的所有微生物中分离总DNA和RNA,包括菌类和藻类,使用相同的柱子同时对RNA和DNA进行柱纯化。
使用DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)对初始大小为200-1500bp 核酸片段,按条件通过两步法对磁珠分选、纯化,进行琼脂糖凝胶电泳验证所得DNA--片段大小,以及用片段分析仪进行片段分析,DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)可达到准确的片段分选效果。
DNA分选纯化试剂盒的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,超过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。
而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候,过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分,导致整个试剂盒效率低下。有很多时候,在提取效果不佳的时候,减少磁珠使用量,反而是提升提取效果的较好途径。
DNA分选纯化试剂盒的优点:
高回收率:片段回收率、文库大小与进口磁珠高度一致;
高重复性:专为片段筛选研发,片段大小可控,重复性好;
高兼容性:适用于手动及自动化工作流程;
高稳定性:有效去除多余的dNTPs、残留引物、盐离子污染,产物纯净、稳定。
DNA分选纯化试剂盒(磁珠法)试剂储藏条件为2-8℃保存,有效期12个月。使用特别的离心吸附柱效率高地与DNA的片段结合,同时能较大限度除去蛋白质、离子及引物小片段等杂质。除了可用于PCR产物回收,对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。可回收100 bp-20 kb,DNA的片段,回收率可高达80%以上(<100 bp或>10 kbDNA的片段,回收率为30%-50%)。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
DNA分选纯化试剂盒的生产周期较短,满足了实际生产需求,具有良好的经济性;此外,此工艺操作简单、易于放大、重复性好,并且建立了相应的质粒DNA质量检测体系,对于药用级质粒DNA大规模制备具有重要的现实意义,也为同类研究的进行奠定了理论基础,为进一步的工业化生产提供了借鉴。
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