提取灵敏度高 只需微量的样本 上海核酸提取
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关 键 词：上海核酸提取
行 业：化工 化学试剂
发布时间：2022-11-27
体液病原DNA提取试剂盒操作简单、快速，所得病原DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可直接用于PCR、RT-PCR、 Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。
体液病原DNA提取试剂盒结合在硅基质膜或磁珠表面的DNA，经含醇的盐溶液漂洗可进一步去除细胞残片、非特异吸附的蛋白质和过浓的盐离子，再经纯水等洗脱液即可将纯度较高的DNA洗脱下来，进而应用于下游实验中（如pcr、酶切、连接、测序等）；通过酚仿释放至溶液中的核酸，可通过调节酸碱度后加入高浓度醇溶液沉淀出来，再经醇溶液洗涤晾干后即可获得高纯度DNA。
体液病原DNA提取试剂盒使用事项：
1、样本体积不足200ul可以加入0. 9% NaC1补足。
2、为确保样本有效裂解，加入BufferGB后，需将样本与Buffer GB充分混匀。
3、如果环境温度超过25"C，无水乙醇应在冰上预冷后使用。
4、Buffer GD中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
5、如需进一步提高DNA 纯度，可重复步骤一次。Buffer PW中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
6、为增加洗脱效率，可将洗脱液在50~60C预热。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0~8.5之间，为了增加DNA回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2min，再次离心收集。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取1.5ml离心管(自备)，加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆，然后再加入200 ul BufferGB，涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇，涡旋震荡15sec，室温放置5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD，室温10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW，室温10000rpm 离心30 sec，弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min，甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液，室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min，离心管底溶液即DNA。
体液病原DNA提取试剂盒组成成分：
1、裂解液DLB；
2、去蛋白液RE；
3、漂洗液WB；
4、洗脱缓冲液EB；
5、吸附柱AC；
6、收集管。
体液病原DNA提取试剂盒的注意事项：
1、血清或血浆避免反复冻融，否则会使蛋白变性或产生沉淀，导致提取的DNA的片段小，提取量下降。
2、如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀，可在56"C 水浴溶解。
3、所有离心步骤均为室温下操作。
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