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黄曲霉B1检测试剂盒原理及用途
黄曲霉B1检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉***B1(AflatoxinB1,AFB1),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样本溶液,样本中的黄曲霉***B1和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗黄曲霉***B1抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含黄曲霉***B1含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中黄曲霉***B1的残留量。
样本处理前须知:实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
配液:配液1:样本提取液70%,即V:V去离子水=7:3。5.3
样本前处理步骤:
谷物、饲料
1)称取2g粉碎样本于离心管中,再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液检测下限20ppb50ppb100ppb样本提取液4ml10ml20ml振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)取0.1ml上清,加入0.4ml去离子水,混匀备用。
谷物、饲料(须吹干)若要求检测下限为5ppb时,可按如下操作:
1)称取2g粉碎样本于离心管中,加入4ml样本提取液,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟;
2)取1ml上层液体在50-60℃条件下用或空气吹干;
3)先加入0.25ml70%溶解剩下的残留物,剧烈震荡2分钟;再加入1ml去离子水,混匀备用。
(注意:这一步与水的加液顺序不能颠倒)
粮油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)称取2g样本于离心管中,再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
检测下限10ppb20ppb40ppb100ppb
样本提取液2ml4ml8ml20ml
然后加入8ml,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)去除上层液体,取0.1ml下层液体加入0.4ml去离子水,混匀备用。