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关 键 词:纯度好,质量优
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2022-10-17
体液病原DNA提取试剂盒(磁珠法)适用于多种生物体液样本(如肺泡灌洗液、痰液、脑脊液等)及拭子样本的微生物DNA提取,可兼容上游经过去宿主核酸流程的样本。
体液病原DNA提取试剂盒组成成分:
1、裂解液DLB;
2、去蛋白液RE;
3、漂洗液WB;
4、洗脱缓冲液EB;
5、吸附柱AC;
6、收集管。
体液病原DNA提取试剂盒采用结合病毒DNA的离心吸附柱和特有的缓冲液系统,体液病原DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的DNA。
该产品可以满足绝大多数的DNA提取要求,如DNA:HBV和CMV等。裂解后,DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,低盐的洗脱缓冲液将纯净的DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。
一般来说,核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等,提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀,离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中,一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法,经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤,操作较为繁琐,现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质,会损害人体健康。另外,受到洗脱液体积的影响,往往难以将回收到的dna全部用于检测,进而影响了检测灵敏度。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤:
1、取1.5ml离心管(自备),加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul BufferGB,涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇,涡旋震荡15sec,室温放置5 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中,将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中,10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD,室温10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW,室温10000rpm 离心30 sec,弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇,10000 rpm离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min,甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中,小心打开吸附柱的盖子,室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液,室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min,离心管底溶液即DNA。
体液病原DNA提取试剂盒的产品特点:
1、不需要使用试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2、节省时间,简捷,单个样品操作一般可在几十分钟内完成。
3、多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种操作,包括PCR、酶切、杂交等。
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