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关 键 词：提取灵敏度高
行 业：化工 化学试剂
发布时间：2022-09-15
体液病原DNA提取试剂盒操作简单、快速，所得病原DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可直接用于PCR、RT-PCR、 Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取1.5ml离心管(自备)，加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆，然后再加入200 ul BufferGB，涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇，涡旋震荡15sec，室温放置5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD，室温10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW，室温10000rpm 离心30 sec，弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min，甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液，室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min，离心管底溶液即DNA。
体液病原DNA提取试剂盒的产品优势：
1、质量优：DNA提取产量高，纯度好，有效去除杂质和下游PCR抑制因子，有效控制外源致病污染；
2、无偏性：无偏倚的微生物核酸提取，兼容多种病原类型，较大程度避免样本中微生物损失；
3、应用广：广泛兼容肺泡灌洗液、痰液、拭子等生物液体样本；
4、高兼容：兼容手动提取及自动提取程序，适配Tecan、Hamilton、PE等核酸提取工作站。
体液病原DNA提取试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的DNA。无需使用氯仿等抽提，特有的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解病毒，使病毒蛋白与DNA分离，在蛋白酶K的作用下降解病毒蛋白，在高盐状态下将DNA选择性吸附于硅基质膜上，再通过快速的漂洗、离心步骤，去除蛋白等杂质，然后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的DNA从吸附柱膜上洗脱下来。
体液病原DNA提取试剂盒组成成分：
1、裂解液DLB；
2、去蛋白液RE；
3、漂洗液WB；
4、洗脱缓冲液EB；
5、吸附柱AC；
6、收集管。
体液病原DNA提取试剂盒结合在硅基质膜或磁珠表面的DNA，经含醇的盐溶液漂洗可进一步去除细胞残片、非特异吸附的蛋白质和过浓的盐离子，再经纯水等洗脱液即可将纯度较高的DNA洗脱下来，进而应用于下游实验中（如pcr、酶切、连接、测序等）；通过酚仿释放至溶液中的核酸，可通过调节酸碱度后加入高浓度醇溶液沉淀出来，再经醇溶液洗涤晾干后即可获得高纯度DNA。
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