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夹持剑突，将胸廓整体向头端外翻并固定，充分暴露心脏，（此步为灌注操作的关键，针尖务必留在左心室，如果发现穿破室间隔、房室隔或心壁，须继续小心进针，直到针头进入升主动脉，然后仍夹持心脏，），灌注预热到体温的生理盐水，同时剪破右心耳放血，直到右心耳流出的液体基本不带血色，zui好刮取细胞，收集在离心管中，1500rpm离心10min（该参数可按自己的经验调整，目的是不损伤细胞结构的情况下去掉培养液成分）。
请保证固定液量充足，固定液和组织的体积比不小于20:1，组织尺寸和容器关系（只装一个的参考标准）：透射电镜芝麻到绿豆大小（如小鼠肾上腺）：请用1，5mlEP管；，黄豆大小（小鼠肾脏）：请用5ml离心管；，铺展面积类似蚕豆大小的组织片：请用平底的25ml广口瓶；，zui好刮取细胞，收集在离心管中，1000rpm离心5~10min（初次离心参数可按自己的经验调整，目的是不损伤细胞结构的情况下去掉培养液成分）。
生物样品TEM各实验步骤要求，取材和预固定，透射电镜动物普通组织，一般动物组织的取材，要点一是减少缺血缺氧时间，二是减少机械损伤，麻醉或断颈处死均可，可根据实验目的和条件选择，具体如下：请尽快用戊二醛固定液预固定，如图5所示，对图片做选取傅里叶变换，选择第二种校正方法，出现的变换结果中，选种对应的变换对称点，点击ok，出现的对话框中，填入对应晶面的1/d数值，并将单位改为1/nm，点击ok即可。
