一次性提取时间短 迅速 便捷 杭州磁珠法提取
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关 键 词：杭州磁珠法提取
行 业：化工 化学试剂
发布时间：2022-08-19
体液病原DNA提取试剂盒的储存条件：磁珠悬浮液和蛋白酶K置于2-8℃保存，其他试剂可室温保存，有效期12个月。
体液中病原dna的提取步骤中，去污剂用于破坏细胞或病毒蛋白外壳或膜结构，使核酸游离到溶液中，胍盐或盐用于变性蛋白质，释放其结合的核酸并促进核酸与硅基质膜或磁珠结合，同时也具有裂解病毒外壳或膜结构的功能，如果使用溶剂，也可以破坏细胞结构，变性蛋白质进而释放核酸。
体液病原DNA提取试剂盒保存条件：常温运输和保存，长期放置时（1月以上）应该放4℃。且具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。
体液病原DNA提取试剂盒的产品优势：
1、质量优：DNA提取产量高，纯度好，有效去除杂质和下游PCR抑制因子，有效控制外源致病污染；
2、无偏性：无偏倚的微生物核酸提取，兼容多种病原类型，较大程度避免样本中微生物损失；
3、应用广：广泛兼容肺泡灌洗液、痰液、拭子等生物液体样本；
4、高兼容：兼容手动提取及自动提取程序，适配Tecan、Hamilton、PE等核酸提取工作站。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、200μl血清等体液（需回复到室温，不足可用0.9%NaCl或者PBS补足）转入上述1.5ml离心管，加入400μl裂解液DLB，立刻涡旋振荡充分混匀。
2、室温(15-25℃)放置10分钟，每隔5分钟，振荡混匀一次。
3、加入450μl无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃，乙醇需要冰上预冷后再加入。
4、将上述混合物加入一个吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl，可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
5、加500μl去蛋白液RE，12000rpm离心30秒，弃废液。
6、加入500μl漂洗液WB，12000rpm离心30秒，弃废液，加入500μl漂洗液WB，重复一遍。
7、将吸附柱AC放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8、取出吸附柱AC，放入一个新的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μl洗脱缓冲液EB（事先在65－70℃水浴中加热效果更好），室温放置1分钟，12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要的DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是至小体积不应少于20μl，体积过小降低洗脱效率，减少DNA产量。
9、DNA可以存放在2-8℃，如果要较长时间存放，可以放置在－20℃。
体液病原DNA提取试剂盒结合在硅基质膜或磁珠表面的DNA，经含醇的盐溶液漂洗可进一步去除细胞残片、非特异吸附的蛋白质和过浓的盐离子，再经纯水等洗脱液即可将纯度较高的DNA洗脱下来，进而应用于下游实验中（如pcr、酶切、连接、测序等）；通过酚仿释放至溶液中的核酸，可通过调节酸碱度后加入高浓度醇溶液沉淀出来，再经醇溶液洗涤晾干后即可获得高纯度DNA。
DNA的分子生物学技术可以用于病源检测、遗传疾病检测、检测、系统进化、物种起源等常用的手段。目前的各种核酸分子生物学技术，包括荧光定量pcr、数字pcr、下一代测序等都获得了大量的进展。但是，这些技术检测结果良好都是以核酸纯化回收效率为前提的。好的DNA纯化技术，应当具备简便、安全、廉价的特点，且回收到的核酸应达到足够的浓度和纯度。
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