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该过程控制在1min内完成，（zui好有压力控制装置，如果没有，zui好采用吊瓶，瓶的悬挂高度应通过动物血压的厘米水柱数值估计，小鼠、大鼠等一般挂在高于动物身体1，5m处，停止盐水灌注，通过三通管换用固定液继续灌注（室温），初始速度与盐水一致；当动物开始强烈抽搐后，降低流速，透射电镜从输液器胶囊观察窗看，维持每秒2滴，（10）常规手术取材、切割标本，浸泡固定30min后转入4℃冰箱过夜（此步骤同普通组织取材）。
夹持剑突，将胸廓整体向头端外翻并固定，充分暴露心脏，（此步为灌注操作的关键，针尖务必留在左心室，如果发现穿破室间隔、房室隔或心壁，须继续小心进针，直到针头进入升主动脉，然后仍夹持心脏，），灌注预热到体温的生理盐水，同时剪破右心耳放血，直到右心耳流出的液体基本不带血色，zui好刮取细胞，收集在离心管中，1500rpm离心10min（该参数可按自己的经验调整，目的是不损伤细胞结构的情况下去掉培养液成分）。
生物样品TEM各实验步骤要求，取材和预固定，透射电镜动物普通组织，一般动物组织的取材，要点一是减少缺血缺氧时间，二是减少机械损伤，麻醉或断颈处死均可，可根据实验目的和条件选择，具体如下：请尽快用戊二醛固定液预固定，如图5所示，对图片做选取傅里叶变换，选择第二种校正方法，出现的变换结果中，选种对应的变换对称点，点击ok，出现的对话框中，填入对应晶面的1/d数值，并将单位改为1/nm，点击ok即可。
