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小型实验动物的脑深部组织、脊髓等不易快速取出固定的标本,或需要大范围、多器官取材时,可采用经心脏灌注固定,透射电镜固定液zui好采用2%多聚甲醛+2,5%戊二醛,需要保全心脏相关结构的实验,或者要观察肺组织充气形态的实验禁用经心脏灌注的方法,具体步骤如下:,这些数据的二次分析成为研究工作分析和论文撰写的重要部分,尤其是高倍透射图片,通过后处理可获得很多充分的数据性结果,能够为结构和机理等的深入分析提供有力证据。
动物组织zui好在离体后1min内开始固定,透射电镜非灌注的组织,厚度不超过4mm,请用恰当方式(比如切成宽薄片)体现位置和层次关系,请尽量不要事先切成很小的颗粒请用锋利薄刀片切组织,朝一个方向划,不要来回切割,不要挤压、拉扯,含有食物残渣、大量血液或其它黏附物的组织,请用生理盐水漂洗,再投入预固定液,zui初的30min以后,zui好在4℃的固定液中浸泡,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使组织结冰,冬季宁可常温送样)。
生物样品TEM各实验步骤要求,取材和预固定,透射电镜动物普通组织,一般动物组织的取材,要点一是减少缺血缺氧时间,二是减少机械损伤,麻醉或断颈处死均可,可根据实验目的和条件选择,具体如下:请尽快用戊二醛固定液预固定,如图5所示,对图片做选取傅里叶变换,选择第二种校正方法,出现的变换结果中,选种对应的变换对称点,点击ok,出现的对话框中,填入对应晶面的1/d数值,并将单位改为1/nm,点击ok即可。