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如果您在结果中注意到“钩状效应”，可能的原因是分析物不足以与样品中抗原的量结合。这个问题也可以通过首先在一系列稀释度下进行预实验测试来解决。如果您发现结果灵敏度较低，则需要检查：
- 试剂盒保存是否正确
- 检测试剂是否充分发挥作用
- 您的样品类型和缓冲液是否兼容
- 靶蛋白和底物浓度/数量是否是足够的
- 读板器的吸附波长设置是否正确
- 记录时间是否足够长
- 您的ELISA试剂盒对您的测定是否具有正确的灵敏度。
在您实验前，请使用少量样本进行预实验摸索zui适合稀释比例，您的样品必须与微量滴定板分析的规格兼容。被测试的生物标记的量将会有所变化，需要通过数据变化进行分析。参考试剂盒中的产品说明书，您的目标是寻找符合样本标准曲线的数据。请注意，含有干扰因素（如胆红素）的样品会产生不准确的结果。
为了充分利用您的试剂盒，Biorbyt建议您使用一系列稀释度的对照样品进行多次测试分析，以获得标准曲线。保存您*珍贵*有价值的样品，直到您确定zui佳的稀释度。一旦你确定使用的样品和稀释度，你即可进行具体的实验设计。按照试剂盒的指导进行所有孔的操作，根据所提供具体信息可适当增加试剂用量。
保证整个ELISA试验过程的准确性将提高您对数据的信心。您的目标是以高精que度生成多条标准曲线。您需要至少以一个样本两次重复（是三个重复）测试您的样本。您需要每个重复之间维持*小的可变系数（％CV），保证重复结果的稳定性。如果数值明显异常，就需要分析可能导致结果异常的潜在原因。异常数值产生的一个可能原因是由于96孔板生产原因或由于外部孔引起的“边缘效应”。会影响实验CV值的因素还包括：样品不正确的储存或制备方式，孔中有气泡，CD3，洗板不完全，试剂混合不当，不恰当的温度控制以及移液操作技术。光密度（OD）高于或低于标准曲线线性范围的样品将分别导致目标浓度被低估或被高估。
