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关 键 词:动物房实验室洁净工程
行 业:环保 净化工程
发布时间:2022-01-05
中净环球净化可提供动物房,动物实验室,动物洁净室,动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室(一)
细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。H前,超净工作台的广泛使用,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。
细胞培养实验室应能进行大方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒火菌处理、储藏。
因此,无论是动物细胞培养室还是植物细胞培养实验室,必定有一下儿种房间。
1.涤问:根据工作量的大小决定其大小。在实验室的一侧设置的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。实验台还应配置水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备洗液缸,用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。
2.培养基配制间:配备的主要仪器设备有:冰箱、天平、微波炉、pH 计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、简、容量瓶、储藏瓶等。
3.滑毒间:配备实验台、高压火菌锅、排风火火设备、过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的手提式简压灭菌锅,较大的实验室可选用立式向动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭饱锅。如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
4.无菌操作室:无菌操作室主要川于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲问闪应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
5.培养室。
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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室(二)
实验室内,还会有以下常用的基本设备。
I.仪器:
1)显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,适温度是 37'℃,温差变化一般不应超过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时,持续数小时即不能耐受,40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3)干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,电热干燥箱升温较高,一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至 10(TC时,停止鼓风,应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后,不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏,应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4)水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除有机物,因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。
5)冰箱:细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。
6)细胞冷冻储存器:储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L~500L,可以储存1m1的安甑250~15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发,应注意观察存留液氮情况,及时定期补充液氮,避免挥发过多而致细胞受损。
7)离心机:进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用 80~100g的离心机即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外,可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途,例如某些细胞的分离制备需梯度离心,则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求,选择适宜级别的天平。要求精密称定时,当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平,在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平,小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器:直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10)滤器:目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。
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实验室生物安全防护的基本原则:
安全设备和个体防护;实验室设计与建造的要求;
安全操作规程;致病微生物及其在实验室之间的传递;
管理制度;微生物危害评估。
实验室内务管理:
1)有内务管理的政策和程序,包括内务工作所用清洁剂和消毒灭菌剂的选择、配制、效期、使用方法、有效成分检测及消毒灭菌效果监测等政策和程序,应评估和避免消毒灭菌剂本身的风险。
2)不应在工作面放置过多的实验室耗材。
3)应时刻保持工作区整洁有序。
4)应专人使用经核准的方法和个体防护装备进行内务工作。
5)不应混用不同风险区的内务程序和装备。
6)应在安全处置后对被污染的区域和可能被污染的区域进行内务工作。
7)应制定日常清洁计划和清场消毒灭菌计划,实验室设备,工作表面。
8)专人监督内务工作,定期评价。
9)实验室的内务规程和所用材料发生改变时通知实验室负责人。
10)实验室规程、工作习惯或材料的改变可能对内务人员有潜在危险时,通知实验室负责人并书面告知内务管理负责人。
11)发生危险材料溢洒时,启用应急处理程序。
12) 相关记录安全保存。
实验室操作与技术:
工作时进出受约束或受限制;禁止吃、喝、吸烟;禁止用口移液;将溅洒和气溶胶减到少;每天对工作面消毒;将废物消毒;保持对昆虫和啮齿类动物的控制。
入实验室:门禁,更衣,填写准出入实验室表。
查看实验室:仪器,试剂,标本,填写使用记录。
操作:防漏,防气溶胶,自身保护,遵守SOP。
废弃物处理:废物桶,废物袋,高压(指示物),登记。
出实验室:更衣,清洁,消毒,填写出入实验室表。
标识系统:
设置原则:安全、明确、醒目、便利、通用。
标识系统分类:警告标识、禁止标识、指令标识、提示标识。
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实验室动物房选址和建筑设计
1、实验动物房应建在环境清洁安静,地势高燥,排水、通风良好,水、电供应有保障的地方。
2、尽量远离工厂、繁华居民区、屠宰厂、畜禽场,以及有疫源威胁和公害污染的地区。生产和科研单位的动物房宜单建筑在一个小区内,与其他部门隔离。
3、清洁准备室的大小,须根据作业内容和消毒灭菌装置等设施占用的空间确定。
4、清洁准备室、清洁走廊同洗涤室以墙壁隔开,墙壁绝不允许出现裂缝。
5、地面要平而不滑,不渗水、不漏水、耐药液腐蚀和耐磨损。对环境要求严格的房间,还要考虑选择发尘低的材料。墙地交角应圆滑无棱角。
6、内墙壁应平滑、耐水、耐磨、耐消毒液腐蚀。墙与墙、墙与顶棚或梁的夹角应圆滑无棱角。
7、顶棚一般不承受压力,使用涂有防水材料的薄水泥板,能经受水冲和消毒水腐蚀。
8、饲养室通常不设外窗,饲养室之间也不设内窗,以避免干扰。
9、饲养室的门,宜采用铝合金密封门,开启方向须注意室内外压差。屏障与非屏障之间的门,应设置非满足一定条件不能开启的装置。
10、木结构一般只作为简易的临时建筑;混合结构多为单层建筑。钢筋混凝土框架结构的整体性好,变形小,宜在多层建筑中采用。钢骨架、用镀锌波纹金属板、内镶聚苯乙烯硬泡沫塑料板做保温层的围护结构具有较好的气密保温性能。