广州PCR核酸检验实验室施工
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关 键 词:pcr生化实验室
行 业:环保 净化工程
发布时间:2021-11-20
中净环球净化科技有限公司可提供PCR检测实验室、核酸检测检验实验室、微生物实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务,技术专业、经验丰富、价格实惠。
试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内;PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到定点,且高度为地面铺装好后2600mm处。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验;所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力;因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。
严格控制进出实验室的人员,与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置立的通道和进出整个实验区的门;尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性;扩增产物分析区是主要的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等。
中净环球净化可提供基因扩增实验室、PCR实验室、检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。
基因扩增实验室和研究工作室的室内净高:当不设置空气调节时,建议不宜低于2.7m,一般为2.7m—2.9m;设置空气调节时,不应低于2.4m,一般为2.4m—2.6m。走道净高不应低于2.2m。基因扩增实验室各个房间的面积并没有严格要求,但是生物安全柜房间建议不能低于10平米,一般为15平米以上,并且每增加一台生物安全柜,房间建议增加10平米;样本间的面积相比其他房间要稍大一些。
基因扩增实验室外窗应具有良好的密闭性及隔热性,窗户的面积根据房间的尺寸来确定,底层、半地下室及地下室的外窗应采取防虫及防啮齿动物的措施。由一个标准单元组成的实验室的门洞宽度应为0.8—0.9m,高度不应小于2.10m;由一个及以上标准单元组成的实验室的门洞宽度不应小于1.2m,高度不应小于2.1m;有要求的房间的门洞尺寸应按具体情况确定,实验室的门扇应设观察窗。实验室缓冲间的面积一般为1300*(1300或1500)mm为宜,并且缓冲间的面积不能大于实验室房间面积的1/8。
单面布房小净宽不应小于1.3m,单走道双面布房小净宽不应小于1.6m,走廊地面有高差时,当高差不足二级踏步时,不得设置台阶,应设坡道,其坡度不宜大于1:8。靠两侧墙布置的边实验台之间的净距不应小于1.5m,当靠一侧墙改为布置拒或实验仪器设备时,其与另一侧实验台之间的净距不应小于1.8m,由一个标准单元组成的常规实验室;靠两侧墙布置的边实验台与房间中间布置的岛式或半岛式实验台之间的净距不应小于1.5m;布置实验仪器设备时,其与实验台之间的净距不应小于1.8m,实验台的端部与走道墙之间的净距不宜小于1.2m。
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实验室自配试剂去离子水、缓冲液等和所有使用器具在使用之前均应高压灭菌或紫外杀菌;尖、反应管等实验耗材应一次性使用。实验应在超净工作台内进行,工作台内应放置PCR的微量离心机、各量程的移液器和其他必须物品;实验的过程中选择合适尺寸的手套并能及时更换,在进出不同实验区域或进行模板操作后都应更换实验服、口罩、帽子及手套,以避免不同实验区交叉污染;吸加试剂和模板的操作应严格按照规范要求进行,遵守“慢吸快打”原则,尽量一次性完成,忌多次抽吸,以避免气溶胶产生的交叉污染;装有PCR试剂的反应管在打开之前应先瞬时离心,将管壁及管盖上的液体离至管底,降低污染手套或加样器的风险;谨慎开启反应管,防止管内液体溅出或形成气溶胶导致污染。
PCR试剂建议小量分装,以减少反复冻融、重复取样次数;多样本PCR反应时,先配制反应混合液分装至反应管中,后加入样本核酸,请勿同时开盖,尽量保证单人单管,实现完全闭管操作;实验试剂应与样品和PCR产物分开保存,不应放于同处;PCR扩增实验完成后及时将反应管取出,用一次性手套将产物反应管包裹丢弃,保证管盖紧闭。
PCR实验室的污染应急处理方法:暂停所有实验操作;清理实验室内所有物品,寻找污染来源;加大实验室的通风;对实验室内所有表面台面、地面及墙面进行消毒;75%酒精空中喷雾;开启紫外消毒装置,延长紫外照射时间4小时以上;以上措施每日进行,直至污染消除;用新试剂及确认无污染的器材进行原污染项目的试剂空白检测,连续3次均阴性后方可进行常规检测。
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试剂储备区:该区域主要完成试剂和主反应混合液的储存、配制和封装工作,所有运送到该区域的试剂和材料不应经过其他区域,试剂和原材料应在本区内储存和制备,本区域的气压应相对外界保持正压;该区域的设备主要是冰箱、天平、混匀器、低速离心机、加样器、可移动紫外灯等;由于该区域有多种试剂,所以“安全”应是平面设计首要考虑因素,平面设计时应保持通风流畅、逃生畅通;实验台布置在房间的两侧,中间的过道全部通向走廊便于疏散;同时根据国际人体工程学的标准,实验台与实验台通道设计为1500mm,中间的通道可满足两边坐人中间过人的要求。
标本制备区:该区域的功能是样本的保存、核酸提取和贮存、样本加入扩增反应管和测定DNA的合成,样本应直接运送至该区并储存在本区内,不得经过其他区域;对于气流压力的控制,由于在本区内加样操作可能产生气溶胶,为避免气溶胶扩散出去对外界造成污染,本区应对外界保持负压;同时本区相对于扩增反应混合物配制和扩增区以及扩增产物分析区为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
扩增区:该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定,此外反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液和已制备的DNA模板(来自标本制备区)的加入等也可在本区内进行;对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出;为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内不必要的走动,个别操作如加样等应在超净台内进行。
分析区:该区域的功能是扩增产物的分析,对于气流压力的控制,该区域是PCR实验的后一步,压力应为,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出;为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。