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在检测前,提前将试剂盒试剂放置室温(或按试剂盒说明书所建议的温度)约30分钟。冷冻样品在使用前也应该完全融化,避免样本多次反复冻融,冻融次数建议少于三次。
保证实验的环境条件,例如整个测定和测定之间的温度和湿度恒定。
确保所有设备都已校准,包括移液器,洗板ji和读取器。
使用足量的抗体。
底物溶液应该是新鲜制备的,而不是在使用前数小时的储存溶液。
在整个测试过程中持续处理样品,并且每次都遵循相同的步骤。
ELISA试剂盒在我们国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联试剂盒、酶联吸附测定试剂盒、酶联分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,抗体库,得到全世界科研工作者的认可及推崇。在欧美及中国获得很大的推广。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体;
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。