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透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用zui为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1-0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌zheng研究,病毒学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。
透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,染色,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100 nm)。要在机体si亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),wright染色,常用戊er醛和锇suan双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。
普鲁士蓝染色(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁qing化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,tunel染色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁qing化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,gus染色,三价铁与亚铁qing化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁qing化物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁qing化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。
Perls stain 常用于显示局部组织内各种chu血xing病变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls 反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。
病理染色-油红O
大鼠主动脉瓣膜油红染色效果
油红染色利用油红O在脂质类的高溶解性,特异性的在组织中甘油三酯沉积处显色。
该染色方法可用于模型定性与半定量分析,亦可用于动脉粥样硬化模型中的脂质堆积的判定。
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