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发布时间:2021-06-15
低温生物的孢子分离法
( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体,洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟,然后连同培养基一起放入接种箱内,经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时,再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹,把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种,然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养,可得纯。
( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布,低温生物菌种多少钱,置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后,便落下孢子,形成印痕(即孢子印)。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,接种在平面或斜面培养基上,进行恒温培养,可得纯。
( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘,直径25 厘米左右,盘内先垫衬4~6 层纱布,中央放1 副9 厘米直径的培养皿,大盖口朝下,上放小的,口向上。然后,在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架,再将带孔的玻璃钟罩盖上,顶上罩孔用棉塞塞好,用纱布包好整个孢子收集器,置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。
低温生物的滤纸保藏法
(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2gt;,121.3℃灭菌30分钟。
(2)将需要保存的,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。
(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。
(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。
(5)将安瓿管放入内有二磷作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干。
(6)将棉花塞入管内,用火焰按图Ⅶ-13熔封,保存于低温下。
(7)需要使用,复活培养时,可将安瓿管口在火焰上烧热,滴一滴冷水在烧热的部位,使玻璃破碎,再用镊子敲掉口端的玻璃,待安瓿管开启后,取出滤纸,放入液体培养基内,降COD低温生物菌种多少钱,置温箱中培养。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,垃圾渗滤液低温生物菌种多少钱,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便,不需要特殊设备。
低温生物的寄主分离法
即从生长有某种真菌的寄主体上(如茯苓、木耳木段)取下木片,进行分离的方法。如木耳制种时,可选朵大、出耳多、质厚的耳棒(即长有木耳的木段)。采集后,降氨氮低温生物菌种多少钱,削去耳根下的树皮,将其横断面锯成1 厘米厚的木片,在无菌条件下,切去无耳菌丝部分,留下有耳菌丝部分,浸入0 . 1 %水中1 分钟,取出再用无菌水冲去木片上的液。然后,用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块,放入斜面培养基内,置24 ~26 ℃下培养,及时淘汰杂菌,选取纯菌丝进行移植培养,即得。