灭菌是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使之达到无菌程度。经过灭菌的物品称“无菌物品”。
玻璃器皿、塑料器皿和器械灭菌：
玻璃器皿可进行干热灭菌或高压蒸汽灭菌，但在蒸汽灭菌后及时烘干水分。
对不能进行高压蒸汽灭菌的塑料器皿可用75%酒精浸泡，使用前在无菌操作台面上晾干的同时，用紫外线重复杀菌。实验室还可以用环氧乙烷灭菌袋对塑料器皿进行消毒，消毒后的器皿要充分散气2～4小时后才可使用。
无菌操作所用的各种器械，一般采用干热或高压蒸汽灭菌，或用75%酒精浸泡，然后在无菌操作台面上晾干的同时再用紫外线重复杀菌；在使用期间可多次对其进行酒精灯火焰灼烧灭菌。
消毒、灭菌的原则：
（一）明确消毒的主要对象：应具体分析引起污染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
（二）采取适当的消毒方法：根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
（三）控制影响消毒效果的因素：许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。
实验室常用灭菌方式之高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）
常用于实验室多数培养基灭菌，也可用于玻璃器皿、金属器皿的灭菌。一般采用121℃高压灭菌15-20min或116℃高压灭菌30min，根据培养基不同可对灭菌参数进行调整。 灭菌效果：可杀灭包括芽孢在内的所有微生物。
注意事项：
1、灭菌锅效力不达标、灭菌过程冷空气未排净、培养基本身含芽孢过多、灭菌方式不正确、灭菌锅内物品摆放过满都有可能导致灭菌失败；
2、在进行容器灭菌时，容器不可密封，需与灭菌锅内空气流通。
实验室常用灭菌方式之干热灭菌：
常用于耐热器皿的灭菌，如移液管、玻璃平皿、玻璃或金属器皿等，可在170℃灭菌2-4h或200℃灭菌0.5-1h。接种环、接种针、涂布棒等实验器材可在酒精灯上直接进行灼烧灭菌。 灭菌效果：灭菌效果强，可杀灭包括芽孢在内的所有微生物。
注意事项：
1、干热灭菌过程的热穿透效果差且比较慢，因此在烘箱内进行干热灭菌时，不可摆放过满；
2、塑料、橡胶等不耐热材质不可采用此方法灭菌；纸张、棉花灭菌温度不能超过170℃；
3、制备好的培养基不可采用此方法灭菌。
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