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DNA连接酶与DNA聚合酶的区别?
形成方式不同
DNA连接酶是在两个DNA部分片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA部分片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA1片段上,碱性磷酸酶,形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用,催化原来的dna进行复1制,然后将原来的dna和复1制以后的dna进行模板配对后,连接聚合在一起,就可以形成新的dna链。
T4 RNA Ligase主要用于RNA和RNA之间的连接,连接时需要5"磷酸基团和3"羟基的存在。不仅可以进行RNA分子间的连接,也可以进行RNA分子(zui短8个碱基)的环化连接。
T4 RNA Ligase可以用于RNA和单核苷酸之间的连接,单核苷酸必须为5"和3"均磷酸化的形式,此时常用于RNA的3"末端标记。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和RNA之间的连接。当DNA提供5"磷酸基团,RNA提供3"羟基时,连接效率较高;当DNA提供3"羟基,RNA提供5"磷酸基团时,连接效率非常低。
T4 RNA Ligase也可以用于DNA和DNA之间的连接,但连接效率非常低。主要用于DNA的环化连接,例如5" RACE中的cDNA环化。DNA和DNA之间的连接尽管可以进行,但比较困难。
磷酸化酶的性质
糖基转移酶类下的一个组群,即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中,包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase,EC2.4.1.1,分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.30.)、海带二糖磷酸化酶(1aminaribiose phosphorylase EC 2.4.1.31.)、纤维糊精磷酸化酶(EC2.4.1.49.)、1,3-β-D-葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.97.)、嘧1啶核苷磷酸化酶(EC2.4.2.2.)、尿苷磷酸化酶(EC2.4.2.3.)、胸腺嘧1啶磷酸化酶(EC2.4.2.4.)、鸟苷磷酸化酶(EC2.4.2.15.)等。例如很有代表性的磷酸化酶是糖原磷酸化酶,糖原在体内降解过程中,该酶是催化糖原还原性末端葡萄糖残基的d-1,4-糖苷键断裂,反应,生成1-磷酸葡萄糖和少了一个葡萄糖基的糖原分子(见图)。这类酶多数是作为生化试剂应用于研究。