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关 键 词:北京电动低速离心机品牌
行 业:机械 仪器仪表 试验机设备
发布时间:2020-11-08
2)等密度离心法
某些密度梯度介质经过离心后会自身形成梯度,如Percoll则可迅速形成梯度,CsCl、Cs2SO4和三碘苯甲酰葡萄糖胺经长时间离心后也可产生稳定的梯度。需要离心分离的样品可和梯度介质先均匀混合,梯度介质由于离心力的作用逐渐形成管底部浓而管顶稀的密度梯度,与此同时原来分布均匀的颗粒也发生重新分布。当管底介质的密度大于颗粒的密度即ρm>ρp时,颗粒上浮;当管顶介质的密度小于颗粒的密度即ρp>ρm时,则颗粒沉降;后颗粒进入到一个它本身的密度位置即ρp=ρm,颗粒不再移动,形成稳定的区带。等密度离心法需时间较长,一般为十几小时至几十小时。
梯度材料的选择原则 ①对被分离的生物样品无作用,不会使生物样品失活;②在溶液中稳定,在离心作用下不会解离或聚合;③在使用的密度范围中,粘度低,渗透压小,离子强度及pH值变化小;④易与被分离的颗粒分开;⑤不会对离心机设备发生腐蚀作用;⑥便于浓度测定等等。这些原则当然比较理想,完全符合每种性能的梯度材料几乎是没有的。下面介绍几种基本上符合上述原则的梯度材料:
(1)糖类:蔗糖、甘油、聚蔗糖(ficoll)、右旋糖酐、糖原等。
(2)无机盐类:CsCl(氯化铯)、RbCl(氯化铷)、NaCl、KBr等。
(3)有机碘化物:三磺苯甲酰葡萄糖胺(martizamide)等。
(4)硅溶胶:Ludox的各种类型,如Percoll。
梯度液的收集 离心后颗粒在梯度液中分层,小心取出离心管,防止振摇以避免分层的
颗粒混和。收集梯度液中颗粒的方法很多,有管底穿孔计滴法、插管虹吸计滴法,浓液顶替法和注射器穿孔抽取法等。
二、根据分离工作量和研究需要进行选择:
1.一般进行研究和小批量制备时多选用台式离心机;
2.进行大批量制备时多选用大型落地式离心机;
超高速离心机分离方法
一:差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。
差速离心是一种常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。
通常在次离心时把大部分不需要的大粒子沉降去掉。这时所需的组份大部分仍留在上清液中。然后将收集到的上清液以更高速度离心,把所需的粒子沉积下来。离心的时间要选择得当,使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。对于得到的沉淀和上清液可以进行进一步的离心,直到达到所需要的分离纯度为止。
差速离心的特点是操作简单,但分离纯度不高。
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二.转子分类
转子是离心机的核心部件,转子一般可分为下列三大类:
1. 固定角转子(俗称角转子):
主要用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。颗粒在扇形溶地移动的距离很短,碰到外壁的颗粒沿着管壁滑到管底,形成沉淀,因此这种转子能很快地收集沉淀物。