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产品规格:96孔/盒
产品数量:1 个
包装说明:常规包装
关 键 词:瘦肉精检测试剂盒,快速检测试剂盒,沙丁胺醇检测试剂盒
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发布时间:2016-06-24
【产品简介】 沙丁胺醇属于β-兴奋剂类药物,可提高胴体瘦肉率,曾被广泛添加于饲料中。人食用了含沙丁胺醇残留的动物性食品,会出现肌肉震颤、心悸、过敏、头痛目眩、恶心、呕吐、发烧、颤栗等症状,世界各国已明文禁止其使用。常规仪器检测方法不能满足实际生产中大批量检测的需求。沙丁胺醇快速检测试剂盒具有方便、快速、灵敏等特点,适用于大批量样品快速检测。 【测定原理】 本试剂盒采用间接竞争ELISA法检测尿样和组织等样本中的沙丁胺醇,在微孔条上预包被偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行,样本中的沙丁胺醇和微孔条上预包被偶联抗原竞争标记有辣根过氧化酶的抗沙丁胺醇抗体,通过洗涤后,用TMB底物显色,样品中的沙丁胺醇含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出沙丁胺醇含量。 【试剂盒技术指标】 规格:96孔/盒 灵敏度: 0.1ppb 检测时间: 45min 样本检测下限: 尿 液………………………………… 0.1ppb 组 织(处理一)…………………… 0.4ppb 组 织(处理二)…………………… 0.1ppb 饲 料 ………………………………… 1ppb 交叉反应率: 沙丁胺醇(Salbutamol )……………… 100% 莱克多巴胺(Ractopamine)……………<0.1% 克伦特罗(Clenbuterol)…………………<0.1% 多巴丁胺(dobutamine)………………<0.1% 样本回收率: 尿 样 ……………………… 85%±10% 组 织 ……………………… 85%±15% 饲 料 ……………………… 85%±15% 【试剂盒组成】 1、微量测试孔:1×96孔板(12条×8孔) 2、沙丁胺醇标准品溶液×6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb 3、高浓度标准品:×1瓶:(1ml/瓶) 100ppb 4、酶标记物 7ml……………………… 红色帽 5、抗体工作液 7ml……………………… 绿色帽 6、底物A液 7ml …………………… 棕色帽 7、底物B液 7ml …………………… 黑色帽 8、终 止 液 7ml …………………… 黄色帽 9、20X浓缩洗涤液40 ml ………………白色帽 【 所用仪器、试剂】 具备的仪器:微孔酶标仪、吹干装置、打印机、均质器 、振荡器、离心机、恒温箱、天平(感量0.01g)、刻度移液管 微量移液器:单道20μl-200μl、100μl-1000μl、多道 250μl 试 剂: 乙腈、、、无水 【实验前溶液配制】 配液1、将30ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。 【样本前处理步骤】 处理任何样本时,都必须注意: (1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。 (2)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。 (a)尿样本的处理方法 取50μl清亮尿样直接测定(如果尿样浑浊一定要过滤或离心10min,4000r/min,直至得到清亮尿样),暂不使用的样本应冷冻保存。 由于尿液阴性样本可能会产生背景干扰 (在某些情况下干扰数值在标准2到3之间),所以推荐标准3即0.3ppb作为尿液阳性结果的CUT OFF判断值。 样本稀释倍数:1 (b)组织样本的处理方法一 1、称2±0.05g组织,加入6ml去离子水,充分振荡2min,室温4000r/min以上离心10min。(注:若组织样本中油脂含量较高,可在振荡后放入85℃水浴10min后再离心)。 2、取50μl上清液进行分析。 样本稀释倍数:4 (c) 组织样本(肌肉和肝脏)处理方法二 1、称取均匀后的组织样本2±0.05g ,加入6ml乙腈溶液,充分振荡2min。4000r/min以上,15℃离心10min; 2、取上清液4ml,在56℃条件下或空气流吹至完全干燥; 肉样本: 加入1ml 去离子水混合振荡30s,取50μl用于分析。 肉样本稀释倍数:1 肝脏样本: 加入2ml振荡溶解,再加入1ml 去离子水混合振荡30s,4000r/min以上,15℃离心5min,去除上层;取50μl下层 与50μl去离子水混匀;取50μl用于分析。 肝样本稀释倍数:2 (d)饲料样品的处理方法 1、称1.0±0.05g研碎的饲料样品,加入10ml,再加入5g无水,放振荡器上振荡2min;15℃ 4000r/min以上离心10min; 2、吸出离心后的上清液2ml,于56℃吹干,用1 ml 去离子水溶解干燥的残留物,再加入1mL混合30s ;15℃ 4000r/min以上离心5min 3、取50μl下层 与50μl去离子水混匀;取50μl用于分析。 样本稀释倍数:10 【酶标免疫分析程序】 操作步骤: 1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 2、按板架及需要取出微孔条,将不用的微孔放入自封袋,保存于2-8℃。 3、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 4、加标准品/样本50μl /孔,然后加酶标记物50μl/孔,再加入抗体工作液50μl/孔。轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板,25℃环境反应30min。 5、取出用洗涤液按每孔250μl洗板4-5次,每次浸泡15-30秒,拍干(拍干后未被清除的气泡用干净的枪头刺破)。 6、显色:每孔加入底物液A液50μl再加B液50μl,轻轻振荡混匀,25℃环境避光显色15min。 7、测定:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测在5min内读完数据),测定吸光度值(OD值)。