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产品规格:96孔/盒
产品数量:1 个
包装说明:常规包装
关 键 词:检测试剂盒,快速检测试剂盒,它酮检测试剂盒
行 业:
发布时间:2016-06-24
【产品简介】
类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性,曾经被广泛应用,作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。它酮在1995年被禁用。由于类药物在体内很快就能被代谢,而在组织中结合的代谢产物则能存留较长的一段时间,所以管理部门就以检测代谢产物为手段达到检测类残留的目的。
它酮代谢物快速检测试剂盒具有方便、快速、灵敏等特点,适用于动物组织(水产、鸡、猪、牛)、牛奶等大批量样品中的它酮代谢物快速检测。
【测定原理】
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测水产和鸡肉等组织样本中的AMOZ,在微孔条上预包被上偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的,样本中的AMOZ和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗它酮代谢物的衍生物抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样品中的AMOZ含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出它酮代谢物含量。
【试剂盒技术指标】
规格:96孔/盒
灵敏度:0.05ppb
检测时间:45min
样本检测下限:
水产品、动物组织……………………… 0.3ppb
蜂蜜……………………………………… 0.3ppb
参考标准GB/T 21311-2007 检测下限为0.5ppb
交叉反应率:
它酮代谢物……………………………… 100%
西林代谢物………………………………﹤0.1%
妥因代谢物………………………………﹤0.1%
唑酮代谢物………………………………﹤0.1%
回收率:
组织、肝脏………………………………90%±15%
蜂蜜、牛奶、肠衣………………………80%±15%
【试剂盒组成】
1、微量测试孔:1×96孔板(12条×8孔)
2、标准液×6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
3、高浓度标准品×1瓶:(1ml/瓶)100ppb
4、酶标记物 7ml………………… 红色帽
5、抗体工作液 7ml………………… 蓝色帽
6、底物A液 7 ml………………… 棕色帽
7、底物B液 7 ml …………………黑色帽
8、终止液 7 ml ………………… 黄色帽
9、20×浓缩洗涤液40 ml…………… 白色帽
10、2×浓缩复溶液 50 ml ……………蓝色帽
11、衍生化试剂 10ml ………………黑色帽
【所用仪器、试剂】
具备的仪器:微孔酶标仪、打印机、均质器 、吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:单道20μl-200μl,100μl-1000μl、
多道250μl
试 剂:、乙酯、、二、浓HCl
【实验前溶液配制】
配液1、将2×浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。
配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照 1:19稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。
配液3、0.1MK2HPO4 称11.4g K2HPO4?3H2O
加去离子水溶解定容至500ml。
配液4、1M HCl溶液
取8.6ml浓HCl加去离子水定溶至100ml。
配液5、1M NaOH溶液
取4g NaOH加去离子水定容至100ml。
【样本前处理方法】
处理任何样本时,都必须注意:
(1)本试剂盒所检测的组织样本包括:动物组织、禽类和水产组织。eg:鸡、鸭、猪、牛、羊、兔、鱼、虾等。
(2)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(3)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。
样本前处理步骤:
该方法为氯霉素和类四项同时检测的五合一前处理方法;用本方法制备出的样品提取溶液可以直接同时应用于本公司研发的氯霉素和唑酮代谢物、它酮代谢物、妥因代谢物、西林代谢物检测试剂盒。(备注:使用该五合一前处理方法检测氯霉素时,因存在一定的干扰;样本检测下限为0.3ppb)
(a) 水产、组织、蜂蜜
1、取2±0.05g均质样本样本,加入 4ml的去离子水,0.5ml1M HCl和100μl衍生化试剂,充分振荡。
2、置于37℃恒温箱孵育过夜(大约16h)或56℃水浴中孵育2h;
3、分别加入5ml 0.1M K2HPO4, 0.4 ml 1M NaOH和5ml乙酯,充
分振荡2min;
4、在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
5、取出2.5ml的乙酯到另一洁净容器中于50℃/空气吹干。
6、用1ml溶解干燥物,用1ml已稀释好的复溶液充分混合
30s;在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
7、取50μl下层用于分析。
样本稀释倍数:1
(b) 特殊样本(畜禽产品组织、肝脏、肠衣、油炸食品、混合肉馅、熟食等)的处理方法
1、取2±0.05g的均质样本于50ml离心管中,6ml的去离子水,充分振荡2min,加入5ml,充分混合震荡3min,4000r/min离心10min。
2、弃除上层有机相液体,吸取4ml下层清澈液体于另一个50ml离心管中,加0.5ml1M HCl和100μl衍生化试剂,充分振荡。
3、置于37℃过夜孵育(大约16h)或56℃水浴中孵育(2h);
4、分别加入5ml 0.1M K2HPO4, 0.4 ml 1M NaOH和5ml乙酯,充分振荡2min;在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
8、取出2.5ml的乙酯到另一洁净容器中于50℃ /空气吹干。
9、用1ml溶解干燥物,用1ml已稀释好的复溶液充分混合30s
在室温下(20-25℃)4000r/min以上离心10min。
10、取出50μl下层用于分析。
样本稀释倍数:2
【酶标免疫分析程序】
1、从4℃冷藏环境中取出所需试剂,置室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔及框架,将不用的微孔放入自封袋,保存于2-8℃。
3、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
4、加标准品/样本 50μl/孔到各自的微孔中,加入酶标记物50μl/孔,然后加入抗体50μl/孔,用盖板膜封板,轻轻震荡混匀。25℃环境中反应30min。
6、显色:每孔加入底物A液50μl,再加底物B液50μl,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光显色15min。
7、测定:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450n