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产品规格:96孔/盒
产品数量:1 个
包装说明:常规包装
关 键 词:快速检测试剂盒,西林检测试剂盒,检测试剂盒厂家
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发布时间:2016-06-24
【产品简介】
类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性,曾经被广泛应用,作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。西林在1995年被禁用。由于类药物在体内很快就能被代谢,而在组织中结合的代谢产物则能存留较长的一段时间,所以管理部门就以检测代谢产物为手段达到检测类残留的目的。
西林代谢物快速检测试剂盒具有方便、快速、灵敏等特点,适用于动物组织(水产、鸡、猪、牛)、牛奶等大批量样品中的西林代谢物快速检测。
【测定原理】
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测水产和鸡肉等组织样本中的SEM,在微孔条上预包被上偶联抗原,利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行,样本中的SEM和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗西林代谢物的衍生物抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样品中的SEM含量与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出西林代谢物含量。
【试剂盒技术指标】
规格:96孔/盒
灵敏度:0.05ppb
检测时间:45min
样本检测下限:
水产品、动物组织……………………… 0.3ppb
蜂蜜……………………………………… 0.3ppb
参考标准GB/T 21311-2007 检测下限为0.5ppb
交叉反应率:
西林代谢物……………………………… 100%
它酮代谢物………………………………﹤0.1%
妥因代谢物………………………………﹤0.1%
唑酮代谢物……………………………… ﹤0.1%
回收率:
组织…………………………………………90%±15%
蜂蜜…………………………………………80%±15%
【试剂盒组成】
1、微量测试孔:1×96孔板(12条×8孔)
2、标准液×6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
3、高浓度标准品:×1瓶:(1ml/瓶) 100ppb
4、酶标记物 7ml………………… 红色帽
5、抗体工作液 7ml………………… 绿色帽
6、底物A液 7 ml………………… 棕色帽
7、底物B液 7 ml ………………… 黑色帽
8、终止液 7 ml ………………… 黄色帽
9、20×浓缩洗涤液40 ml…………… 白色帽
10、2×浓缩复溶液 50 ml ……………蓝色帽
11、衍生化试剂 10ml ………………黑色帽
【【所用仪器、试剂】
具备的仪器:微孔酶标仪、打印机、均质器 、吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:单道20μl-200μl,100μl-1000μl、
多道250μl
试 剂:、乙酯、、二、浓HCl
【实验前溶液配制】
配液1、将2×浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。
配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照 1:19稀释
(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按所需用量配制洗涤液
配液3、 0.1MK2HPO4 称11.4g K2HPO4?3H2O
加去离子水溶解定容至500ml。
配液4、1M HCl溶液
取8.6ml浓HCl加去离子水定溶至100ml。
配液5、1M NaOH溶液
取4g NaOH加去离子水定容至100ml。
【酶标免疫分析程序】
1、从4℃冷藏环境中取出所需试剂,置室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔及框架,将不用的微孔放入自封袋,保存于2-8℃。
3、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
4、加标准品/样本 50μl/孔到各自的微孔中,加入酶标记物50μl/孔,然后加入抗体50μl/孔,用盖板膜封板,轻轻震荡混匀。25℃环境中反应30min。
5、取出将孔内液体甩干,用洗液250μl/孔洗板4-5次,每次间隔15-30秒,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
6、显色:每孔加入底物A液50μl,再加底物B液50μl,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光显色15min。
7、测定:每孔加入终止液50μl,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,在5min内读完数据),测定每孔OD值。
【注意事项】
1、使用前将所有试剂温度回升至室温20-25℃。试剂及标本没有回到室温(20-25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会伴随着出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应 立即进行下一步操作。
3、混合要均匀,否则会出现重复性不好的现象。
4、反应终止液为2M酸,避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒,稀释或搀杂使用会引起灵敏度、OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。
6、不用的微孔板放进自封袋密封;标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
7、显色液若有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位(A450nm< 0.5 )时,表示试剂可能变质。
8、该试剂盒最佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。