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人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织（WHO）和KRUGER标准，并通过ISO9001认证。北京牛精子分析W.H.O 5
通过比较进行质量评估
1．室内比较是采用同一个标本在同一参数下经CASA多次测定后应用适当的统计学方法对测得数值进行比较。在男科实验室中对CASA系统的质量控制通常使用影像磁带或完全相同的冻存**标本进行日间比较。当室内比较作为结果质量的一种评估时计算机中数值的在线获得是极具优势的。
2．室间比较要求标本向其他几个实验室运送文献中的一些报道阐述了该方面的经验但是运动精子是不能在不受限制的条件下运输的将其置于液氮中运送需进一步考虑更多的因素（解冻技术、标本的处理等）这些因素会影响活动力参数；到目前为止室间比较的研究还未见满意报道；Jorgensen等进行了研究尝试克服实验室间运送解冻标本的困难其研究方式是：邀请四个实验室的实验人员携带各自的仪器到同一个地点以各自通常采用的实验方法进行精子评估但未见明确的结论。3．对于精子活力测定CASA系统的测定与直观评估的比较有文献进行了报道但结果并不相同。认为直观评估揭示标准数值且其差异是由CASA系统的错误引起的该观点是不正确的；无论从理论上还是实践中CASA数值比直观评估所获得的数值更接近于真值；对直线前进的精子比例而言这一点是非常正确的。 北京Hamilton Thorne精子分析WOBCASA系统用量少，检测速度快，能够显著提高实验室的工作效率。
精子分析仪使用方法
仪器的使用方法因型号、厂家差异不尽相同，操作人员上岗前必须经过严格培训，了解工作原理、操作规程、校正方法等，使用前必须仔细阅读说明书。一般仪器都会经历如下操作步骤 [1]：开机接通电源，打开计算机辅助**分析系统。1.输入患者信息及**理学检查结果。2.加样取液化的**1滴，滴入精子计数板的计数池中，置显微镜操作平台上，点击“活动显示”菜单，调节好显微镜焦距，显示器上即可显示待测标本的精子运动图像。3.分析点击“计算分析”菜单，系统进入自动分析状态，图像显示区出现精子分割图像并进行分析。4.打印报告分析结束后，可根据需要打印出分析结果。
精子手工计数原理及操作方法
1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 精子分析仪的出现简化了检验流程，提高了诊断的可靠性，对于提升男性生殖健康领域的Z疗效果具有重要作用。
医生为了鉴定男性生育能力，常嘱男方作精液检查，正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者，可呈淡黄色，若出现鲜红色. 暗红色，则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2~6毫升，常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状，1小时之内应液化为稀薄的液体，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液丝长度一般不超过2厘米，否则视为异常。精液呈弱碱性，PH值为7.2~7.8。正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精 ＞=50%。世界卫生组织推荐精子活动力分为四级：0级：不活动；1级：精子原地摆动；2级：有中等的前向运动；3级：前向运动活跃，快速直线运动。正常的精子活动力为2~3级的精子＞=40%~50%.精子形态：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论，应对精子数量 活力 活动率 液化时间 畸形率等多方面进行综合能力分析。 采集精液前5～7天内必须停止性生活，并且不得有**、梦遗等情况，还应禁烟戒酒，忌服对生精功能有影响的药物等。全自动精子分析仪极大提高临床检验水平，广泛应用于泌尿科，男性科以及计划生育、优生优育研究等。北京精子分析LIN
Hamilton Thorne精子分析仪具有高度的可靠性和稳定性，能够长时间稳定运行，保证数据的准确性和可重复性。北京牛精子分析W.H.O 5
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向运动精子百分率上的相关性较低］。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较，其结果为：采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数；变异系数（CV）是29％活动精子比率的CV为24％平均路径速度（VAP）的CV为43∙85％。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术（授精IVF）的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能；同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。北京牛精子分析W.H.O 5
