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关 键 词:武汉病原DNA提取
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2023-04-01
体液病原DNA提取试剂盒的储存条件:磁珠悬浮液和蛋白酶K置于2-8℃保存,其他试剂可室温保存,有效期12个月。
体液病原DNA提取试剂盒用于从各种液体样品中提取DNA的试剂盒。可以处理各种液体样品(血液,血清,血浆,脑脊液,淋巴液,细胞培养上清液等)、单个或少量的细胞等。提取的DNA与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
试剂盒特点:
1.DNA的回收率高。
2.一管式操作,减少了样品污染的可能。
3.一站式套装,降低了实验误差。
4.安全无毒,不需要使用一些溶液。
5.试剂稳定,可以长期放置。
体液病原DNA提取试剂盒的产品特点:
1、不需要使用试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2、节省时间,简捷,单个样品操作一般可在几十分钟内完成。
3、多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种操作,包括PCR、酶切、杂交等。
一般来说,核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等,提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀,离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中,一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法,经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤,操作较为繁琐,现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质,会损害人体健康。另外,受到洗脱液体积的影响,往往难以将回收到的dna全部用于检测,进而影响了检测灵敏度。
体液病原DNA提取试剂盒使用事项:
1、样本体积不足200ul可以加入0. 9% NaC1补足。
2、为确保样本有效裂解,加入BufferGB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。
3、如果环境温度超过25"C,无水乙醇应在冰上预冷后使用。
4、Buffer GD中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
5、如需进一步提高DNA 纯度,可重复步骤一次。Buffer PW中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
6、为增加洗脱效率,可将洗脱液在50~60C预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0~8.5之间,为了增加DNA回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2min,再次离心收集。
体液中病原dna的提取步骤中,去污剂用于破坏细胞或病毒蛋白外壳或膜结构,使核酸游离到溶液中,胍盐或盐用于变性蛋白质,释放其结合的核酸并促进核酸与硅基质膜或磁珠结合,同时也具有裂解病毒外壳或膜结构的功能,如果使用溶剂,也可以破坏细胞结构,变性蛋白质进而释放核酸。
体液病原DNA提取试剂盒保存条件:常温运输和保存,长期放置时(1月以上)应该放4℃。且具有挥发性,使用后需要将瓶盖拧紧。
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