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关 键 词:深圳DNA纯化
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2023-02-26
DNA分选纯化试剂盒洗脱含有浓缩的DNA和RNA,无需进一步沉淀;可纯化基因组DNA和各种大小的RNA。
DNA分选纯化试剂盒对于磁珠法而言,每增加一部分液体体积,就减少了更多的磁珠碰撞几率,而降低磁珠碰撞几率,会导致吸附率的大幅度下降。所以很多时候,虽然增加裂解液和洗涤液确实能够起到增强裂解和增强洗涤的作用,但磁珠法提取的核心是磁珠吸附核酸的效率,无法保证磁珠碰撞效率是不能保证核酸提取效率的,所以单纯增加试剂使用量改善提取效果并不一定完全有效。
DNA分选纯化试剂盒的生产周期较短,满足了实际生产需求,具有良好的经济性;此外,此工艺操作简单、易于放大、重复性好,并且建立了相应的质粒DNA质量检测体系,对于药用级质粒DNA大规模制备具有重要的现实意义,也为同类研究的进行奠定了理论基础,为进一步的工业化生产提供了借鉴。
通常情况下,DNA分选纯化试剂盒给出的参考磁珠用量都是略微过量的,因此需要增加磁珠用量改善吸附效率的情况并不多,但如果确定是磁珠用量不足导致的提取效果不好,是可以在一定范围内通过增加磁珠用量来改善提取效果的。
以GNT-02系列磁珠为例,在提取常量样本(植物组织,全血等)时,通常用量为10ul/次;在提取微量样本(如血清游离DNA,口腔拭子等)时,磁珠用量为15~20ul/次。
DNA分选纯化试剂盒通过实时PCR(SYBR Green)检测大肠杆菌16SrDNA,通过提供的0.45μm水过滤柱过滤加入过量大肠杆菌的50mL水样,同时分离总RNA和DNA,并进行实时PCR。发现含有不同大肠杆菌量的所有测试水样都对应于实时PCR结果。通过大肠杆菌16S rDNA引物特检测到大肠杆菌,其浓度低至102cfu /ml,表明DNA的高质量和过滤系统的率。
DNA分选纯化试剂盒主要是利用交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。
DNA分选纯化试剂盒采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。
离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散,从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。
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