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宁波争光树脂有限公司
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Hydrolite®EP107为聚甲基丙烯酸酯骨架的、中大孔径、携带有环氧基团的固定化酶载体,可通过共价结合固定化青霉素G酰化酶、头孢菌素C酰化酶等水解酶在内的广泛酶类,用于抗生素药物中间体、成品药物的合成等领域,也可进一步偶联特定的配基形成新的固定化载体或亲和树脂。
产品具有粒度均匀、载酶活力高、反应速度快、机械强度优等特点,尤其适用于水相体系下的催化反应,并配备有不同的粒度范围,以满足不同产物特性、使用方式、反应体系等的需求。
载体的基本参数如下所示:
外观 | 白色至米白色不透明珠体 |
粒径范围 | 100-300 μm(EP107F,适合于釜式反应) 300-500 μm(EP107M,适合于釜式反应或柱式反应) |
骨架 | 聚甲基丙烯酸酯 |
官能团 | 环氧基 |
含水量 | 62-67% |
平均孔径 | 40-100 nm |
pH稳定性 | 5-9 |
储存和运输 | 2-8 ℃密闭储存,储存环境应干燥、阴凉和保持通风良好,环境温度下装运,短期温度偏移不会对材料产生不利影响 |
载酶方法:固定化是在pH值和温度非常温和的实验条件下,在高离子缓冲强度下进行的,具体条件需要根据载体和酶的不同进行摸索以寻求。附件中为青霉素G酰化酶的固定化方法,以供参考。
附件:
青霉素G酰化酶酶的固定化
1、称取载体样品5 g用K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液(2 M,pH=7.8)洗球3遍,每遍30 ml,滤干。
2、称取上述载体样品1 g置于锥形瓶中,加入1200 U青霉素酰化酶液,再用K2HPO4-KH2PO4缓冲溶液(2 M,pH=7.8)定容至10 ml,混合均匀后,密封瓶口,于27 ℃下摇床振荡20 h,170 rpm。
3、滤出已固载酶的载体,纯水洗涤至茚三酮检测流出液阴性。【如考虑封闭未反应的环氧基,可悬浮于15 ml磷酸盐缓冲溶液(0.1 M,pH=7.8)中,加入乙醇胺(1 mmol/g载体),于25 ℃摇床振荡6 h,170 rpm】。
4、滤出载体,检测酶活,待用。