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发布时间:2022-11-25
67个y-str基因座分别为:dys19、dys385a/b、dyf387s1a/b、dys388、dys389-i、dys389-ii、dys390、dys391、dys392、dys393、dyf399s1、dyf404s1a/b、dys437、dys438、dys439、dys443、dys444、dys446、dys447、dys448、dys449、dys456、dys458、dys459a/b、dys460、dys481、dys485、dys504、dys505、dys508、dys510、dys518、dys520、dys522、dys527a/b、dys531、dys533、dys549、dys552、dys557、dys570、dys576、dys587、dys593、dys596、dys612、dys617、dys622、dys626、dys627、dys630、dys635、dys641、dys643、dys644、dys645、dys710、dys720、y-gata-a10、y-gata-h4;其中,dys385a/b、dyf387s1a/b、dyf404s1a/b、dys459a/b、dys527a/b分别包含两个分型片段,dyf399s1包含三个分型片段。二、引物组合的制备1、人工设计并合成用于扩增每个基因座的引物(要求扩增长度**好300bp以下),然后进行pcr扩增,获得每个基因座的特异性扩增产物。2、综合单个基因座的扩增条件,广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务,选择适宜扩增程序,进行复合扩增,广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务。由于复合的基因座数目较多,广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务,引物间相互抑制情况复杂,所以需要一一排除,找出这些基因座,重新设计并合成引物。此外,不同基因座的引物之间还会形成引物二聚体。迈杰转化医学致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点,助力精z准医疗!广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)在多种恶性**中存在异常***,并与**的发***展密切相关,已成为目前“不限*种”的热点研究靶标之一。至今已有4款靶向FGFR的抑制剂上市:国际***FDA批准的泛FGFR抑制剂为强生的Balversa(Erdafitinib),同时获批的伴随诊断为QIAGENE基于PCR方法的FGFR2/3异常检测;2020年获批的Incyte公司的Pemigatinib为较早胆管*靶向药物,其伴随诊断为FoundationMedicine的FoundationOneCDxNGSpanel,检测FGFR2融合或重排;2021年,又有连续两个药物Futibatinib和Infigratinib获批,***携带FGFR2融合或重排的局部晚期或转移性胆管*患者。伴随诊断和生物标志物的开发和验证,已成为患者分层/富集及药物上市的“标配”。基于综合性转化医学研究平台,迈杰转化医学研究针对FGFR抑制剂的药物临床研究提供从生物标志物检测到伴随诊断产品开发的完整解决方案。 四川Claudin18.2迈杰转化医学NGS平台技术指导迈杰转化医学设有病原体检测平台Qiastat-Dx进行呼吸道及胃肠道病原体检测。
2015年一项针对4853例各类实体瘤NGS研究表明,FGFR的功能异常发生于7.1%的**样本中,其中基因扩增、基因突变以及染色体重排分别占比为66%、26%及8%,FGFR1、FGFR2、FGFR3及FGFR4在发病患者中占比为3.5%、1.5%、2.0%及0.5%。发生率较高的**有尿路上皮*、胆管*、乳腺*、子宫内膜*、鳞状上皮*等,同时,在肺*、肝*等**中也发现了FGFR的异常***(图3)。图3各类实体瘤中FGFR突变频率[1]04FGFR抑制剂研究现状FGFR抑制剂有望成为泛*种靶向***的新选择,所以FGFR靶点在**领域受关注度较高,目前国内多家药企布局FGFR靶向疗法的研究开发(表2)。表2中国的FGFR抑制剂研发现状05FGFR抑制剂生物标志物研究FGFR抑制剂获批和在研药物,以及相应的临床试验生物标志物研究总结如表3。表3FGFR抑制剂及临床试验生物标志物[7-9]检测FGFR基因变异包括融合、重排、扩增和点突变以及其配体的过表达等,涉及DNA、RNA和蛋白质表达等多个生物学层面,检测方法主要有NGS,qPCR,FISH,IHC以及RNAscope等(表4)。
既节约时间又降低测序成本。目前,基于法庭科学领域运用**多的ngs系统为illumina公司的miseqfgxtm系统和thermofisher公司的iontorrentpgmtm系统,但针对以上平台的二代测序商业化str分型试剂盒的研发尚处于起步阶段,主要有powerseqautosystem(promega,madison,wi,usa)、forenseqtmdnasignatureprepkit(illumina,sandiego,ca,usa)和precisionidglobalfilerngsstrkit(termofisher,waltham,ma,usa)。但以上试剂盒涉及的y-str相对较少,三个试剂盒分别包含了1个y-str基因座、26个y-str基因座、2个y-str基因座。同时存在试剂盒价格昂贵,配套的数据分析软件只能针对各自开发试剂盒,参数的设置相对固定,只能对固有基因座的测序数据进行分析,不利于法医学实际应用。因此,构建一种适用于当前主流二代测序检测平台miseqfgxtm系统及开放性测序数据分析软件straitrazor、myflq等,且能容纳更多y-str基因座的复合扩增体系具有一定的意义。技术实现要素:本发明的目的是制备检测更多y-str基因座的试剂盒,提高了父系亲缘关系分析能力和鉴定效能。本发明首先保护引物组合,可包括引物1—引物120;引物1—引物120均为单链dna分子,核苷酸序列依次可如seqid**—seqid**20所示。 MSH2抗体试剂 苏苏械备20180568号.
本发明属于法医学技术领域,具体涉及基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒及其使用的引物组合,尤其涉及基于二代测序技术检测67个y-str基因座和amelogenin基因座的试剂盒及其使用的引物组合。背景技术:短串联重复(shorttandemrepeat,str)是由2~6bp重复单位串联组成且***存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的dna序列,是目前法医个体识别和亲子鉴定应用*****的遗传标记。人类y染色体短串联重复(y-chromosomeshorttandemrepeats,y-str)具有父系遗传、缺乏重组、分型简单、信息量大、多态性高等特点,是研究人类的起源进化、民族差异、种族差异、群体及地区分布等的有力工具。因此,y染色体str基因座多态性研究可为法医学个体识别和亲权鉴定提供重要手段,在诸如父系家族的亲权鉴定、混合斑男性成分的检测、不同男性个体混合物的分析、追溯父系迁移历史及重构同一父系家族等方向都具有*特的应用价值。目前,荧光标记多重扩增结合毛细管电泳(fluorescentlabeledmultiplexpcr-capillaryelectrophoresis,pcr-ce)是str分型的主流技术;常用的商业化y-str分型试剂盒有y23(promega)、y(promega)、yfiler(thermofisherscientific)和yfilerplus。 迈杰转化医学利用数字PCR进行低丰度突变研究等;提供循环肿l瘤DNA检测,可检测EGFR、ERBB2等Biomarker。江苏抗体全迈杰转化医学NGS平台经验丰富
使用北欧*组化质控中心NordiQC推荐的IHC抗体组合。广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务
包括67个y-str基因座和1个性别决定基因座amelogenin)。相比于illumina公司的forenseqtmdnasignatureprepkit,本发明提供的试剂盒中包含41个新的y-str基因座,能提供更多新的遗传信息。而且本发明提供的复合扩增体系中所有y-str基因座的**大扩增子长度都小于300bp,而forenseqtmdnasignatureprepkit中有约%(7/24)基因座的**大扩增子长度大于300bp,不利于降解检材的分析。本发明提供的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验摸索获得的,试剂盒中的引物具有不可替换性;即引物被替换后,部分基因座将会被抑制且抑制效果不可预知。实验证明,采用本发明提供的试剂盒检测标准品2800m中68个基因座的str分型,分型结果准确。本发明具有重要的应用价值。附图说明图1为67个y-str基因座的pcr扩增产物的长度范围分布。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。标准品2800m为promega公司的产品,产品目录号为dd7251。广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务
迈杰转化医学研究(苏州)有限公司是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在江苏省等地区的医药健康中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身不努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是较好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同迈杰转化医学供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!