损伤性小 有效控制外源污染 武汉DNA提取试剂盒
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关 键 词:武汉DNA提取试剂盒
行 业:化工 化学试剂
发布时间:2022-10-28
经体液病原DNA提取试剂盒分离的DNA适用于多种下游应用,包括PCR、Real-Time PCR、mNGS文库构建等,为科研及体外诊断提供保障。
体液病原DNA提取试剂盒组成成分:
1、裂解液DLB;
2、去蛋白液RE;
3、漂洗液WB;
4、洗脱缓冲液EB;
5、吸附柱AC;
6、收集管。
体液病原DNA提取试剂盒使用事项:
1、样本体积不足200ul可以加入0. 9% NaC1补足。
2、为确保样本有效裂解,加入BufferGB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。
3、如果环境温度超过25"C,无水乙醇应在冰上预冷后使用。
4、Buffer GD中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
5、如需进一步提高DNA 纯度,可重复步骤一次。Buffer PW中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
6、为增加洗脱效率,可将洗脱液在50~60C预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0~8.5之间,为了增加DNA回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2min,再次离心收集。
体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤:
1、取1.5ml离心管(自备),加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul BufferGB,涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇,涡旋震荡15sec,室温放置5 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中,将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中,10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD,室温10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW,室温10000rpm 离心30 sec,弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇,10000 rpm离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min,甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中,小心打开吸附柱的盖子,室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液,室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min,离心管底溶液即DNA。
体液病原DNA提取试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的DNA。无需使用氯仿等抽提,特有的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解病毒,使病毒蛋白与DNA分离,在蛋白酶K的作用下降解病毒蛋白,在高盐状态下将DNA选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心步骤,去除蛋白等杂质,然后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的DNA从吸附柱膜上洗脱下来。
体液病原DNA提取试剂盒的产品优势:
1、质量优:DNA提取产量高,纯度好,有效去除杂质和下游PCR抑制因子,有效控制外源致病污染;
2、无偏性:无偏倚的微生物核酸提取,兼容多种病原类型,较大程度避免样本中微生物损失;
3、应用广:广泛兼容肺泡灌洗液、痰液、拭子等生物液体样本;
4、高兼容:兼容手动提取及自动提取程序,适配Tecan、Hamilton、PE等核酸提取工作站。
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