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发布时间：2022-05-11
大肠平板计数法检测分为两个阶段。在初培养中，选取2～3 个适宜的连续稀释度， 每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿接种1mL。同时取1mL生理盐水加入另外的无菌平皿作阴性对照。迅速将 15mL～20mL冷却至 46℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）加入每个平皿中。小心地旋转平皿，使培养基与样液充分混匀，等到琼脂凝固以后，再加入3mL～4mLVRBA 覆盖平板表层。翻转平板铺匀后，DST大肠菌群检测系统仪，放在 36（℃±1）℃培养18～24h。平板菌落数按照以下方法选择：选取菌落数在 15CFU～150CFU之间的平板，天津DST大肠菌群检测系统，分别计数平板上出现的典型和的大肠菌群菌落。
大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法。
1、是以100mL(g)检样内大肠菌群较大可能数(MPN)表示，检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；
2、以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示，检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全 食品微生物学检验 大肠菌群计数》。
3、现行食品标准中规定的大肠菌群指标以“CFU/克或CFU/毫升”为单位的，适用GB 4789.3-2016，故检测样品前需根据产品标准认真选择方法。
例如，DST大肠菌群检测系统装置，GB/T2717-2003酱油卫生标准中对大肠菌群的要求需使用方法一GB/T 4789.3-2003。又如GB/T 2718-2014酱油卫生标准中对大肠菌群的要求需使用方法二GB4789.3-2016。
用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL，加入无菌平内。每个样品接种三个连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平内倾注15mL45~50℃的Aiiz-gal琼脂，迅速轻轻转动平，使混合均匀。待琼脂深固后，再倾注3mL-5mL Aliz-sal琼脂覆盖表面。同时将Aliz-gal琼脂倾人加有1mL上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的无菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，翻转平板，干37 1℃培养箱培养18h-24h。取出平板，DST大肠菌群检测系统仪器，计数紫色(或红色)菌落。
培养基检验原理:胰酪胨提供碳氮源、维生素和矿物质满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氡二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基硫酸钠可抑制革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生-半乳糖苷酶，分解液体培养基中的酶底物茜素-B-D-半乳糖苷(Aliz-gal)，使素游离并与固体培养基中的铝、钟、铁、钱离子结合形成坚备(或红色)的罄合物，使菌落呈现相应的颜色。
