韶关病毒抑制效果测试中心 华微检测
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发布时间：2024-09-30
病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸(DNA或RNA)，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型生物。病毒灭活试验是利用某种有代表性的活病毒及其细胞感染技术，评价各种消毒因子的病毒杀灭效果，验证消毒因子的病毒灭活能力。
病毒灭活试验病毒悬液的制备：
1、从液氮中取出冻存的试验用宿主细胞，在37°C温水中迅速融化，用毛细吸管移植于含有细胞维持液的细胞管内，吹吸数次，使混匀,立即离心(3000r/min， 3min) ，去上清液。再加入适当的细胞维持液，吹吸数次，使混匀，同上离心后，转种于加有10完全培养基的培养瓶中。逐日观察细胞生长情况，在细胞长满单层时，用于消毒试验。
2、取出低温冻存的试验病毒毒种，37°C水浴融化，用细胞维持液作10倍稀释，然后接种于已经长满单层细胞的细胞瓶内，置37°C温箱中，使与细胞吸附、生长。逐日观察病变，待3/4细胞出现病变时，收获病毒。
3、将含有病毒及宿主细胞的培养液，在冰浴条件下，用超声波(或反复冻融)破碎宿主细胞，释放病毒。然后，尽快离心(6000r/min,15min)去除沉淀(主要为细胞碎片)，上清液即为所需的病毒悬液。按每管1. 0分装于无菌离心管(1.5)中。
4、取1支病毒悬液，按病毒滴度测定法，测定其病毒滴度。其余均冷冻保存于-80°C备用。
病毒培育与灭活实验：
1、实验材料：
实验用病毒株，宿主细胞，细胞培养瓶与 96 孔培养板，恒温水 浴箱，二氧化碳培养箱，层流**净工作台，-80℃低温箱，二氧化碳培养箱，液氮，离心设备，移液器，细胞维持培养基，细胞完全培养基，去离子水等。
2、实验过程：
病毒悬液制备：实验组，阳性对照组，阴性对照组。病毒培育需每日观察细胞与宿主细胞生长情况，接种细胞，病变收获病毒， 每组按照特定条件设置病毒灭杀实验验证，并每组进行噬斑病毒感染滴度测定。平均灭活对数值计算，评价。
病毒灭活效果测试：
病毒消杀产品检测在对消毒产品开展病毒杀灭效果检测工作时，会根据产品实际情况进行病毒灭活分析，病毒灭活效果验证。
病毒灭活效果测试：
主要适用于消毒产品鉴定或日常监测。用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术，评价各种用途的消毒因子对测试病毒的杀灭效果。病毒杀灭效果试验，主要适用于消毒产品鉴定或日常监测。用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术，评价各种用途的消毒因子对测试病毒的杀灭效果。
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